临床全自动ELISA的常用模式

根据抗原和抗体检测的不同，ELISA自动检测模式有多种，如直接法、间接法、双抗体夹心法(直接法、间接法)、竞争抑制法(直接法、夹心法等)、捕获法等。临床实验室常用的ELISA检测模式有双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、竞争抑制法和捕获法。

在抗原的测定中，最常用的蛋白质大分子抗原测定模式是双抗体夹心法。对于只有单个表位的小分子，采用竞争抑制法;抗体测定常用间接法、双抗原夹心法、竞争抑制法和捕获法。

1.ELISA工作站双抗体夹心法

对于含有多个表位的大分子蛋白质ELISA工作站用双抗体夹心法测定是相当简单的。目前商用的蛋白抗原检测试剂盒基本都采用这种检测模式。

第一批抗原双抗体夹心法全自动ELISA试剂盒全部采用“两步法”。后来为了缩短检测时间，简化操作步骤，试剂厂家逐渐引入了“一步法”。医疗测试设备．

目前，我们临床实验室对HBsAg、甲胎蛋白(α-fetoprotein， αFP)、前列腺特异性抗原(PSA)、CA系列标志物、hCG、激素等大分子抗原的测定基本采用一步法。与两步法相比，一步法操作简单，但也有其固有的缺点。如果处理不当，由于钩效应的存在，双抗体夹心免疫分析结果会出现假阴性或定量结果偏低的情况。

2.ELISA工作站竞争法试验

小分子半抗原如地高辛、茶碱和其他药物和激素如T3、T4和睾酮可能只有一个表位。或者因为分子太小，在与一个抗体结合后，由于空间位阻，无法与另一个抗体结合，所以不能使用双抗体夹心法进行测量。ELISA工作站只能使用竞争抑制法。

在这种分析模式下，需要获得小分子和酶的组合。小分子酶缀合物的制备不像抗体酶缀合物那样简单，其纯化也相当困难。小分子结合酶与游离酶的分子量差小，用一般的分子筛法难以分离。因此，有人尝试在合成二聚体或多聚体小分子的基础上，建立双抗体夹心竞争ELISA法测定小分子。提高了测定方法的灵敏度和特异性。

3.ELISA工作站抗体间接测定法

测量人体对传染性疾病病原体抗原产生的抗体，同样适用于狗万3.0手机客户端 ．在难以获得高纯度、明确的抗原之前，或抗原较为复杂时，一般采用间接法。

目前临床常用的丙型肝炎病毒抗体(anti-HCV)检测项目均为间接法，采用间接法检测抗体。严格来说，只检测IgG类抗体，不涉及IgM和IgA类抗体。这是由酶标记的二抗确定的。目前一些特异性IgⅢ抗体检测试剂盒采用的是间接法。

4.ELISA工作站双抗原夹心法

双抗原夹心法检测的抗体包括所有类型的特异性抗体，不受非特异性IgG的干扰。因此，双抗原夹心法检测抗体的敏感性和特异性均高于间接法。目前，为了提高抗体检测的敏感性，ELISA工作站的试剂盒基本采用了双抗原夹心法，只是抗- hcv由于其抗原性质比较复杂。

5.ELISA工作站竞争法

抗体的测定一般不使用竞争法。当抗原中的杂质难以清除或抗原的结合特异性不稳定时，ELISA工作站可以使用该模式来测定抗体。最典型的例子是乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)和乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的测定。